化瘀补肾方对卵巢切除小鼠骨折愈合的作用

目的观察化瘀补肾方对卵巢切除小鼠骨折愈合的作用。方法 3月龄雌性C57BL/6小鼠48只分为假手术组、模型组和化瘀补肾方组各16只。模型组和化瘀补肾方组小鼠采用双侧卵巢切除术(OVX)建立骨质疏松症模型。术后12周,各组小鼠建立左侧胫骨中段骨折模型。术后给予化瘀补肾方组小鼠化瘀补肾方灌胃,给予假手术组与模型组小鼠等体积生理盐水灌胃,至骨折术后4周取材。检测各组小鼠血清雌二醇水平,采用Micro-CT检测小鼠第4腰椎及左侧胫骨的骨密度,检测左侧胫骨最大应力,对左侧胫骨石蜡切片进行阿尔辛蓝/橙黄G染色,观察骨组织形态学变化。结果 OVX后4周开始,模型组小鼠体重明显升高,并持续高于假手术组(P0.01)。骨折术后4周,模型组小鼠血清雌二醇和第四腰椎骨密度(BMD)明显低于假手术组(P0.01),化瘀补肾方组小鼠血清雌二醇水平和第四腰椎BMD高于模型组(P0.01)。Micro-CT三维重建显示,模型组左侧胫骨仍有明显的骨折线,骨痂生长不明显,化瘀补肾方组骨折线模糊,骨痂形成明显。与假手术组相比,模型组小鼠的BV/TV(P0.01)、Tb.Th(P0.05)和Tb.N(P0.01)均明显降低,Tb.Sp明显升高,化瘀补肾方组小鼠的BV/TV(P0.05)、Tb.Th(P0.05)相较于模型组则显著升高,但Tb.N、Tb.Sp差异无统计学意义。与假手术组比较,模型组小鼠胫骨的最大应力在骨折术后28 d时显著低于假手术组(P0.01),化瘀补肾方组小鼠胫骨的最大应力显著高于模型组(P0.01)。阿尔辛蓝/橙黄G染色显示,假手术组和化瘀补肾方组骨痂组织处于塑形期,可见明显骨小梁结构,而模型组骨痂组织内见大量脂肪组织,骨小梁稀疏。结论化瘀补肾方能有效促进去卵巢小鼠的骨折愈合,改善愈合骨组织的生物力学性能。     

蠲痹汤调控淋巴管回流功能治疗膝骨关节炎的研究＊

目的 探讨蠲痹汤（JBT）对膝骨关节炎（KOA）小鼠模型淋巴管回流功能及关节病理退变的影响。方法 将120只C57BL小鼠随机分成JBT，莫比可（MOBIC）与PBS组。小鼠右膝接受内侧半月板失稳（Destabilization of medial meniscus，DMM）手术以诱导KOA模型，左膝作为假手术对照。使用近红外光谱检测系统评估关节淋巴管回流情况；ABHO染色评估关节软骨的面积及OARSI评分；免疫组织化学染色观察膝关节II型胶原含量及软骨细胞退变指标蛋白聚糖降解产物（Nitege）的积累。结果 与PBS、Mobic组比较，JBT组小鼠膝关节的ICG清除率在术后4周和8周明显增强，OARSI评分较低；JBT组关节软骨中Nitege的表达低于PBS组，但是II型胶原表达高于PBS组。结论 JBT可以促进早期KOA小鼠膝关节淋巴管回流功能，并且延缓KOA的病理进程。蠲痹汤是一种有效治疗膝骨关节炎的中医药经典方剂，其疗效机制可能是通过上调关节淋巴回流功能实现的。     

氧化应激对骨重建的影响

骨形成和骨吸收之间的协调平衡共同维持着骨重建的稳态。由于衰老、雌激素缺乏等因素引起体内氧化体系与抗氧化体系之间的平衡被打破,导致活性氧生成增多,发生氧化应激。近年来的研究发现活性氧所引起的氧化应激反应对骨重建过程中的骨形成和骨吸收均有重要的影响,机体内积累产生的过多活性氧通过对细胞因子、酶活性以及信号通路的调节,干预核内基因的转录表达,最终导致骨髓间充质干细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞增殖凋亡或分化功能的异常,使骨重建失衡,形成以骨吸收为主的代谢性骨病,从而引起骨质疏松症。因此,笔者就近年来氧化应激的产生及氧化应激对骨髓间充质干细胞、成骨细胞、骨细胞、破骨细胞的影响,骨质疏松症的抗氧化治疗等方面作一综述,对进一步认识氧化应激在骨重建中的生理病理学机制有着重要意义。     

针刺在加速康复外科中的应用*

加速康复外科（enhanced recovery after surgery,ERAS）是21世纪外科术后康复的主题,需要对学科共同参与。中医是我国传统医学,在治疗疾病促进机体功能康复方面有着独特的疗效,针刺是中医学的重要组成部分,本文综述针刺在围手术期疼痛、恶心呕吐、尿潴留、胃肠功能紊乱方面的临床研究进展,希望针刺作为中医元素的一种,广泛应用到围手术期的ERAS管理之中,逐渐创建具有中国特色的ERAS管理方案。     

老年人五脏虚证基本证型主要症状Delphi法专家调查

目的?通过专家调查，探讨老年人五脏虚证基本证型具有特征性、代表性的主要症状。方法?基于文献总结及专家意见调查，制订“老年人五脏虚证证候框架”调查表。运用Delphi法遴选31名专家对老年人五脏虚证基本证型主要症状开展3轮函询调查。专家按照0~10分对量表每个条目的重要程度打分。通过均数及其变异系数评价专家意见集中程度，并通过协调系数对专家意见协调程度进行评价。结果?三轮调查的专家积极系数分别为83.9%、96.2%、100.0%，各条目必要性的协调系数分别为0.308、0.469、0.631（P<0.001），平均变异系数分别为0.197、0.162、0.090；第三轮调查的专家权威系数9.35；专家对老年人五脏虚证基本证型主要症状的集中意见分别为心气虚证5项、心阳虚证7项、心血虚证8项、心阴虚证6项、肺气虚证8项、肺阴虚证7项、脾气虚证6项、脾阳虚证7项、肝血虚证4项、肝阴虚证8项、肾阴虚证7项、肾阳虚证9项、肾气虚证5项、肾精虚证9项。结论?老年人五脏虚证包含14种基本证型，47种具有特征性、代表性的症状。     

加味牛蒡子汤促进TNF-α转基因小鼠淋巴管回流功能防治类风湿关节炎的实验研究

目的观察加味牛蒡子汤(JWNBZT)对类风湿关节炎(RA)模型动物TNF-α转基因(TNF-Tg)小鼠关节炎症和关节周围淋巴回流功能的影响。方法将16只清洁级3月龄左右TNF-Tg小鼠按照体重随机分为TNF-Tg组和JWNBZT组,每组8只。另取10只同窝对照体重相似的野生型小鼠(WT)作为对照组,JWNBZT组每天以JWNBZT灌胃,对照组和TNF-Tg组每天以等量纯净水灌胃,治疗12周后小鼠足底皮下注射吲哚菁绿(ICG)测量小鼠淋巴管回流功能,并取踝关节制作石蜡切片进行苏木素-伊红(HE)染色观察炎性浸润和关节骨质破坏情况,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞数量。结果与对照组比较,TNF-Tg组小鼠淋巴管回流功能出现明显损害,Clearance和Pulse明显下降,淋巴管渗漏面积增多,踝关节内出现明显炎症浸润且骨质减少,距骨内破骨细胞增多(P0.05);与TNF-Tg组比较,JWNBZT组小鼠淋巴管回流功能明显增强,Clearance和Pulse升高,淋巴管渗漏面积减少,踝关节内炎症浸润减轻且骨质增多,距骨内破骨细胞减少(P0.05)。结论 JWNBZT能够减轻RA受累关节的炎症浸润和关节骨质破坏,并促进淋巴管回流功能,这可能是其治疗RA的机制。     

温肾阳方及其拆方通过TGF-β信号通路促进小鼠肢芽干细胞增殖与分化

目的?探讨温肾阳方及方中单味中药骨碎补、淫羊藿是否通过TGF-β信号通路促进小鼠肢芽干细胞增殖与分化。方法?分别采用温肾阳方（0.42 g生药/mL）、骨碎补（0.09 g生药/mL）及淫羊藿（0.09 g生药/mL）煎剂和等体积生理盐水给大鼠灌胃，制备含药血清，分离孕12.5天小鼠肢芽干细胞进行微团培养，含药血清干预后，CCK-8法检测肢芽干细胞增殖能力，阿尔新蓝染色检测软骨分化能力，IPP软件统计软骨球个数及面积，Real-time PCR法检测Col2a1及Aggrecan表达水平。采用293T细胞，脂质体转染TGF-β信号通路报告基因4×SBE，荧光素酶实验分析各组对TGF-β信号通路的调节作用。采用TGF-β信号通路抑制剂SB431542抑制肢芽干细胞中TGF-β信号通路，进行阿尔新蓝染色及软骨细胞外基质检测。结果?与空白组比较，温肾阳方、淫羊藿、骨碎补组干预48 h和72 h后小鼠肢芽干细胞增殖均增强（P<0.01，P<0.05）。阿尔新蓝染色显示，温肾阳方、淫羊藿、骨碎补组软骨球个数及面积增加（P<0.05），软骨细胞基质Col2a1及Aggrecan的表达增强（P<0.01）。荧光素酶实验发现，与空白组比较，各中药组TGF-β信号通路活性上调（P<0.01，P<0.05）。加入TGF-β信号通路抑制剂SB431542后，与空白组比较，抑制剂组软骨球个数及面积均明显减少（P<0.01）；而温肾阳方、淫羊藿、骨碎补组软骨生成抑制显著缓解（P<0.05），但与空白组比较，软骨球个数及面积仍明显减少（P<0.01，P<0.05），Col2a1及Aggrecan水平也有相似的变化趋势（P<0.01）。结论?温肾阳方及温肾阳药骨碎补、淫羊藿可以部分通过TGF-β信号通路促进小鼠肢芽干细胞增殖与分化。     

核因子-κB影响骨折愈合细胞作用的研究进展

骨折是人类常见的大器官损伤,从发生至完全愈合需数月甚至更长的时间,若为严重骨折,如粉碎性骨折、骨折骨坏死,可发生延迟愈合甚至不愈合。骨折愈合受多种因素的影响,在愈合过程中,多种信号通路、细胞及细胞活性物质发挥重要作用。近年来研究发现,核因子-κB调节多种细胞代谢,影响骨折愈合过程的相关细胞增殖、分化、分泌活性物质等环节。该文综述在骨折愈合过程中核因子-κB影响骨折愈合细胞作用的研究进展,为骨折愈合的治疗提供新的思路。     

骨折愈合中骨髓间充质干细胞与骨骼肌卫星细胞的阴阳属性

<正>以低骨量丢失为特征的骨质疏松症已然成为老龄化社会的主要医疗保健问题。全世界每年约发生890万例骨质疏松性骨折^[1]。在欧美约1/3～1/2的女性在其一生中会经历骨质疏松性骨折^[2]。在全球每年由骨质疏松症引起的骨折病例中，20%～25%发生在男性，随着严重骨折(如髋部)在男性中的发病率逐年增多，男性骨质疏松症发病率也将逐渐增高^[3]。